KOZLOV DMITRIJ GEORGIEVICH,Козлов Дмитрий Георгиевич,CHEPEREGIN SERGEJ EHDUARDOVICH,Чеперегин Сергей Эдуардович,GUBAJDULLIN IREK ILJASOVICH,Губайдуллин Ирек Ильясович,EFREMOV BORIS DMITRIEVICH,Ефремов
申请号：
RU2012101212/10
公开号：
RU0002489481C1
申请日:
2012.01.16
申请国别(地区):
RU
年份:
2013
代理人:
摘要：
FIELD: biotechnologies.SUBSTANCE: microorganism-producent is cultivated in a suitable nutrient medium with subsequent extraction and treatment of target protein. At the same time the producent is yeast strain Saccharomyces cerevisiae, transformed with the expression vector, which contains an area of initiation of replication of endogenic 2-mcm plasmid of yeast Saccharomyces cerevisiae, and also a yeast promotor GAL1, which controls gene expression, including a DNA sequence SEQ ID NO: 1, coding a fused protein, the composite parts of which are aminoacid sequences of the protein E7-HSP70 and the protein of ubiquitin of yeast Saccharomyces cerevisiae, occupying within the fused protein an N-end position ending with a processing site, which separates it from the sequence of the protein E7-HSP70 and recognised natural ubiquitin-specific yeast proteinases. The yeast strain Saccharomyces cerevisiae VKPM Y-3853 - producent of the protein E7-HSP70 - is produced by transformation with the expression vector pPDX3U-E7-HSP70 of the yeast strain Saccharomyces cerevisiae D702.EFFECT: group of inventions provides for high level of biosynthesis and yield of treated protein E7-HSP70, production of a water-soluble correctly processed protein E7-HSP70, principal absence of toxic and pyrogenic bacterial LPS in preparations of the protein E7-HSP70.2 cl, 4 dwg, 12 exГруппа изобретений относится к области биотехнологии. Культивируют микроорганизм-продуцент в подходящей питательной среде с последующим выделением и очисткой целевого белка. При этом в качестве продуцента используют дрожжи Saccharomyces cerevisiae, трансформированные вектором экспрессии, который содержит область инициации репликации эндогенной 2-мкм плазмиды дрожжей Saccharomyces cerevisiae, а также промотор GAL1 дрожжей, контролирующий экспрессию гена, включающего последовательность ДНК SEQ ID NO:1, кодирующую слитый белок, составными частями которого являются аминокислотные последовательности белка E7-PISP70 и белка убиквити
