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一种达氏鲟脾脏组织细胞系的构建方法
- 专利权人:
- 中国长江三峡集团公司中华鲟研究所
- 发明人:
- 刘娟娟,杜合军,肖衎,刘雪清,赵珣
- 申请号：
- CN201510342724.9
- 公开号：
- CN104894056B
- 申请日:
- 2015.06.19
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2017
- 代理人:
- 蒋悦
- 摘要：
- 本发明提供一种达氏鲟脾脏组织细胞系的构建方法，主要包括如下步骤：（1）制备含胎牛血清、人表皮生长因子，人碱性成纤维样细胞生长因子和达氏鲟鱼血清的pH值为7.2‑7.4的MEM培养液，于4℃冰箱保存备用；（2）从达氏鲟鱼体内分离出脾脏组织，采用组织块培养法进行原代培养；（3）待细胞生长形成单层，底部覆盖率70%以上时，用0.25%胰酶消化进行传代培养。（4）对生长旺盛，形态均一的脾脏细胞进行液氮冷冻保存及复苏培养。本发明构建的脾脏组织细胞系，增殖快速，形态多呈成纤维样，可连续传代，并可冻存复苏。该构建方法技术简单，易操作，可推广到其它鲟鱼类脾脏细胞的培养，还可望用于达氏鲟物种资源保护及鲟鱼疾病病原尤其是病毒病原的分离鉴定。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
