本发明公开了一种抑癌基因丝氨酸-苏氨酸激酶11真核表达载体及其构建方法,表达载体为pCMV‑LKB1,基因序列为SEQ ID NO:NM_000455.4;构建方法包括:通过提取293‑T细胞的总RNA、反转录成cDNA,设计引物,PCR扩增目的片段和PCR产物行琼脂糖凝胶电泳后回收目的片段获取LKB1目的片段;pCMV‑blank质粒的扩增和提取;克隆载体pMD18‑LKB1;重组真核表达载体pCMV‑LKB1。本发明构建抑癌基因丝氨酸-苏氨酸激酶11真核表达载体pCMV‑LKB1,其表达产物可抑制肿瘤的转移、侵袭,能稳定表达抑癌基因LKB1产物,用于肿瘤的辅助治疗。