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一种高活性7位点突变的猪干扰素α突变体及其制备方法和应用
- 专利权人:
- 安阳工学院
- 发明人:
- 梁秀丽,魏法山,魏战勇,郑兰兰,王朋涛,夏璐,张福良,王雪平,龙福庆,贾雪娜
- 申请号：
- CN201910779235.8
- 公开号：
- CN110343164A
- 申请日:
- 2019.22.08
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2019
- 代理人:
- 摘要：
- 本发明属于干扰素领域,特别是指一种高活性7位点突变的猪干扰素α突变体及其制备方法和应用。本发明对猪干扰素α基因进行改造以获得新的基因序列,通过改造提高其生物活性。运用重叠PCR的方法对天然猪干扰素α基因进行定点突变,将改造后的基因克隆到pET‑32a载体上构建重组质粒,将鉴定正确的重组质粒克隆到Rosetta表达菌中诱导表达和鉴定,重组蛋白以包涵体形式表达,蛋白分子质量约32KDa,经纯化和透析处理后,获得纯度较高的猪干扰素α突变体,用细胞病变抑制法测定抗病毒活性;结果表明试验所得的突变体蛋白的抗病毒活性为8.15×108U/mg,比体外表达的野生型干扰素活性提高了大约200倍。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
