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兔血中超氧化物歧化酶的纯化制备方法
- 专利权人:
- 青岛康大食品有限公司;青岛中创生物科技有限公司
- 发明人:
- 张姝倩,葛安山,孙莎莎,陈宴霞,宋玉龙
- 申请号：
- CN201510407291.0
- 公开号：
- CN105039273A
- 申请日:
- 2015.07.13
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2015
- 代理人:
- 史霞
- 摘要：
- 本发明属于生物蛋白技术领域，具体涉及兔血中超氧化物歧化酶的纯化制备方法。该方法主要包括如下工艺步骤：将兔血中加入抗凝剂，离心收集沉淀；将沉淀用生理盐水冲洗，离心，去除血红蛋白；去离子水等倍体积搅拌溶血；向溶血液中加入等倍体积95%预冷乙醇，0.2倍体积的预冷氯仿；搅拌，离心，取上清；上清加热到60℃，保温15分钟，然后速降至室温，离心，取上清；生理盐水中冷却，加入预冷丙酮，搅拌，取沉淀，用去离子水溶解；脱盐层析；沉淀用HAC-NaAC溶液清洗2次后用PBS溶液重溶，再通过0.45um的滤纸过滤；离子交换层析；超滤；SOD洗脱液在4℃的条件下离心，取上清，即为SOD原液。本发明的方法操作简单，提取的超氧化物歧化酶纯度高。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
