The present invention is directed to providing a sheet-like cell culture with high mechanical strength and a method of producing the same.(I) to regulate the ratio of the number of cells in both cell types in a cell population including myoblasts and fibroblasts(II) step by step (I) to seeding the cell population onto the culture substrate(III) the cell population seeded in step (II) was deposited in the cell culture solution.Forming a sheet-like cell cultureThe step of separating the sheet cell culture formed in the (IV) step (III) from the culture substrateSeeding density of cell population in stepAfter seeding to the culture substrateImmediately after the cell settled on the culture substrateThe density of cells on the substrate is 90% or more of all cellsBy providing a method for producing sheet-like cell culturesThe above problem was solved.本発明は、機械的強度が高いシート状細胞培養物、およびその製造方法の提供を目的とする。 (i)筋芽細胞と線維芽細胞とを含む細胞集団における両細胞種の細胞数の比率を調整するステップ、(ii)ステップ(i)で得た細胞集団を培養基材に播種するステップ、(iii)ステップ(ii)で播種された細胞集団を細胞培養液中でシート化し、シート状細胞培養物を形成するステップ、および(iv)ステップ(iii)で形成されたシート状細胞培養物を培養基材から剥離するステップを含み、ステップ(ii)における細胞集団の播種密度が、培養基材への播種後、細胞が培養基材上に沈降した直後に、培養基材上で互いに接する細胞の割合が全細胞の90%以上となる密度である、シート状細胞培養物の製造方法を提供することにより、上記課題が解決された。