本发明公开了一种重组花生过敏原与突变体及其制备方法和应用。本发明所述重组花生过敏原是天然存在的过敏原衍生的非天然存在的变异体,其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明利用基因工程技术,经密码子优化后人工合成重组花生过敏原的编码基因,并采用生物信息学软件分析其抗原表位,通过定点突变的方法,针对一个或多个抗原性高的位点进行定向置换,以降低其过敏源性,构建成低过敏原性的重组花生过敏原突变体。利用在人工控制的条件下进行蛋白表达,获得高纯度的重组花生过敏原及其突变体蛋白。与天然花生过敏原相比,该重组蛋白突变体与特异性IgE的结合能力明显降低,可安全地应用于过敏性疾病的诊断与治疗乃至判断其它蛋白过敏原性的高低。