本发明公开了一株携带两个G基因和犬瘟热病毒H基因的重组狂犬病病毒及其应用。该重组病毒是以狂犬病病毒HEP‑Flury株为骨架，在狂犬病病毒（dG株）基因组G与L之间再插入SEQ ID NO.1所示的H基因，构建出携带两个G基因和H基因的重组质粒pHEP‑dG（H），并利用狂犬病的反向遗传操作系统拯救筛选出能同时表达狂犬病病毒双G蛋白和犬瘟热病毒H蛋白的重组狂犬病病毒。该重组狂犬病病毒可以在细胞上稳定的增殖，外源基因H和dG能同时高效表达，免疫小鼠可以诱导产生较高的抗狂犬病病毒和犬瘟热病毒抗体，对免疫小鼠100%的保护。且该重组病毒是一种弱毒疫苗，可以直接作为疫苗应用，具有较高的应用前景。
