本发明涉及一种检测单头烟粉虱携带番茄褪绿病毒的TaqMan探针和引物及其应用。检测单头烟粉虱携带番茄褪绿病毒的TaqMan探针,探针的5’端标记FAM,3’端标记BHQ1,核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。检测单头烟粉虱携带番茄褪绿病毒的TaqMan引物,该引物为一对,上游引物核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,下游引物核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明针对传毒介体烟粉虱,选取ToCV保守序列设计TaqMan PCR引物及探针,建立快速检测单头烟粉虱体内携带ToCV病毒的TaqMan实时荧光定量PCR的方法,该扩增方法灵敏度高,特异性强,2小时内便可出结果,快速且检测结果可靠。