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一种无标记猪β-防御素2基因定点敲入质粒载体及其应用
- 专利权人:
- 华中农业大学
- 发明人:
- 周锐,黎璐,黄靖,王安田,黄超
- 申请号：
- CN201911385470.3
- 公开号：
- CN110951784A
- 申请日:
- 2019.29.12
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2020
- 代理人:
- 摘要：
- 本发明属于动物基因工程技术领域,具体涉及一种无标记猪β‑防御素2基因定点敲入质粒载体及其应用。本发明与转基因动物领域相关。构建了能表达双拷贝pbd‑2基因的供体质粒pcCAG‑R26‑PBD2‑T2A‑PBD2,该供体质粒还含有双侧带有loxP序列的新霉素抗性基因neoR表达盒。试验证明,将该质粒与能同时表达Cas9蛋白与靶向猪Rosa26位点的向导RNA的打靶质粒pX330‑pRosa26同时电转入受体细胞,实现了pbd‑2基因定点整合入猪的Rosa26位点,并通过Cre重组酶删除了抗性标记,经体细胞核移植及胚胎移植能够得到无抗性标记的pbd‑2基因定点敲入猪。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
