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一种热带雨林土壤微生物宏基因组Fosmid文库构建方法
- 专利权人:
- 海南省农业科学院植物保护研究所
- 发明人:
- 赵志祥,严婉荣,肖敏,陈绵才,曾向萍
- 申请号：
- CN201710757204.3
- 公开号：
- CN107475244A
- 申请日:
- 2017.08.29
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2017
- 代理人:
- 黄耀钧
- 摘要：
- 本发明属于微生物领域，公开了一种热带雨林土壤微生物宏基因组Fosmid文库构建方法，采用PVPP洗涤，去除杂质后，溶菌酶—蛋白酶K—SDS—CTAB裂解法，提取和纯化大片段的土壤微生物基因组DNA；经琼脂糖凝胶低电压电泳和脉冲电泳检测；末端修复宏基因组DNA，将marker和小样切下，使用连接酶将回收产物连接到Fosmid载体pCC1FOS上；连接反应在2h内完成；连接产物经λ包装提取物包装，EPI300‑T1R菌株转染，涂于含12.5μg/mL的氯霉素的LB平板上，37℃，过夜培养。本发明反映在热带雨林这一极端的环境中，微生物及其基因资源极端而丰富，有利于微生物功能基因挖掘与利用。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
