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一种以在体枣果实为材料的基因瞬时表达方法
- 专利权人:
- 河北农业大学
- 发明人:
- 刘孟军,刘志国,袁野
- 申请号:
- CN202010483950.X
- 公开号:
- CN111621516A
- 申请日:
- 2020.06.01
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2020
- 代理人:
- 摘要:
- 本发明涉及一种以在体枣果实为材料的基因瞬时表达方法,根据NCBI数据库中序列信息,同源克隆获得目的基因,通过酶切‑连接将目的基因整合到植物过表达质粒载体中,再将重组植物载体转入农杆菌GV3101中。在LB培养基中28℃震荡培养农杆菌至OD600达1.0~1.2,离心集菌,倒去LB培养基,使用含有MgCl2、MES和乙酰丁香酮的渗透液重悬菌体待用。使用医用注射器将农杆菌渗透液注入半红期的在体枣果实。通过观察枣果实表型变化、检测目的基因表达量及相关代谢产物含量,验证目的基因的功能。该方法避开了枣树稳定遗传转化重复性差、转化率低、耗时长等问题,可在短时间内验证基因功能,简单、快速且节约成本。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/