A method is disclosed for highly efficient DNA sequence alterations. The method is useful for editing chromosomes, to engineer cellular markers through insertion of genes, or to create epigenetic changes by using cas9-enzyme fusions where the enzymes can be DNA epigenetic modifying enzymes or chromatin modifying enzymes, etc. The technology also differs from all previously known technologies in that the CRISPR/Cas system can function in ways that are "clean", i.e. they have not been in contact with any virus, or are carried DNA molecules that can insert into the chromosome in unintended locations.L'invention concerne un procédé d'obtention d'altérations de séquences d'ADN hautement efficaces. Le procédé est utile pour éditer des chromosomes, pour modifier des marqueurs cellulaires par insertion de gènes, ou pour créer des variations épigénétiques en utilisant des fusions d'enzymes-Cas9, les enzymes pouvant être des enzymes de modification épigénétique d'ADN ou des enzymes de modification de la chromatine, etc. La technologie diffère également de toutes les technologies connues jusqu'ici en ce que le système CRISPR/Cas peut fonctionner de manière « propre », c'est-à-dire qu'il n'a été en contact avec aucun virus, ou qu'il transporte des molécules d'ADN qui peuvent être insérées dans le chromosome dans des emplacements non souhaités.
