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一种制备条斑紫菜R-藻红蛋白荧光探针的方法
- 专利权人:
- 上海海洋大学
- 发明人:
- 何培民,蔡春尔,周铭,汪卿,柳俊秀,李春霞
- 申请号：
- CN200810204718.7
- 公开号：
- CN101750482A
- 申请日:
- 2008.12.17
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2010
- 代理人:
- 瞿承达
- 摘要：
- 一种制备条斑紫菜R-藻红蛋白荧光探针的方法，特征是该方法在温度为20℃条件下进行以下各步骤：先以3-(2-吡啶二巯基)丙酸n-羟基琥珀酰亚胺酯与R-藻红蛋白摩尔比为40∶1进行R-藻红蛋白的衍生化，摇床避光低速振荡2小时，用Sephadex G-25脱盐柱收集衍生化的R-藻红蛋白；再以二硫苏糖醇与抗体摩尔比为500∶1进行抗体的巯基化，摇床低速振荡1小时，用Sephadex G-25脱盐柱收集巯基化的抗体；最后按衍生前R-藻红蛋白与抗体的质量比3∶5的比例取衍生化的R-藻红蛋白与巯基化的抗体混合，摇床低速震荡12小时，后加入100μl的N-乙基马来酰亚胺，反应30分钟，接着以Sephacryl S-300HR层析柱分离纯化，洗脱液为50mmol/L磷酸盐缓冲液+150mmol/L氯化纳、pH7.0，收集分离的交联产物，即为条斑紫菜R-藻红蛋白荧光探针。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
