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VERFAHREN ZUR HERSTELLUNG EINER KARDIOMYOZYTENMATRIX
专利权人:
发明人:
申请号:
EP11769150.1
公开号:
EP2559755A2
申请日:
2011.04.01
申请国别(地区):
EP
年份:
2013
代理人:
摘要:
Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung einer Kardiomyozyt-Matrix unter Anwendung einer Kollagen-Chitosan-Unterlage und Nährböden zum Züchten von menschlichen embryonalen Stammzellen oder ihrer Derivate. Damit die Züchtungsqualität und -stabilität und die proliferative Aktivität der pluripotenten Stammzellen einschließlich ihrer Ausdifferenzierung in die Kardiomyozyten erhöht, die Immunogenität der Mikroumgebung der Zellen vermieden und die Erzeugung einer für die direkte Transplantation geeigneten Kardiomyozyt-Matrix sichergestellt ist, sieht die Erfindung vor, dass Biomasse menschlicher embryonaler Stammzellen einer feederfreien hESKM-05-Linie unter Einsatz eines Hauptbodens mTeSR in mit Matrigel bedeckten Flaschen angelagert und mit Hilfe einer 0,05%igen Dispase-Lösung passiert wird, dass die Zellen danach mit Hilfe von Dispase in einen koDMEM-Boden unter Zugabe von 10%igem Serumersatzmittel SR, 100 µg/ml Kanamycinsulfat, 1 mM der L-Glutamin-Lösung und 1 mM einer essentiellen Aminosäure-Lösung sowie 2 µg/ml einer 5-Aza-2-Deoxycytidine-Lösung oder 2 µm einer Natriumbutyrat-Lösung versetzt und im Laufe von 3 Tagen stimuliert werden, um aus den embryonalen Stammzellen embryonale Körperchen zu bilden und dass die embryonalen Körperchen dabei des Weiteren auf eine vorbereitete Kollagen-Chitosan-Matrix überführt und im Nährboden koDMEM unter Zugabe von 1 mM der essentiellen Aminosäure-Lösung, 1 mM der L-Glutamin-Lösung, 10%igem Serumersatzmittel SR, 10-7 M Retinsäure und 10 ng/ml Askorbinsäure kultiviert werden, wobei der Boden alle drei Tage gewechselt wird.the invention relates to a process for the production of a kardiomyozyt matrix using a collagen - chitosan - base and matrices for growing human embryonic stem cells or their derivatives.the z\u00fcchtungsqualit\u00e4t and stability and the proliferative activity of the pluripotent stem cells and their differentiation into the kardiomyozyten increased the immunogenicity of the microenvironment of the c
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/
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