Provided is an isolation and cultivation method for mesenchymal stem cells, the isolation and cultivation method comprising: obtaining primary cells of mesenchymal stem cells; cultivating and amplifying the primary cells of mesenchymal stem cells; and Isolating mesenchymal stem cells. Further provided are a cryopreservation and resuscitation method for mesenchymal stem cells, and thus the mesenchymal stem cells can be stored and resuscitated.L'invention concerne un procédé d'isolement et de culture de cellules souches mésenchymateuses, le procédé d'isolement et de culture comprenant : l'obtention de cellules primaires de cellules souches mésenchymateuses ; la culture et l'amplification des cellules primaires de cellules souches mésenchymateuses ; et l'isolement de cellules souches mésenchymateuses. L'invention concerne en outre un procédé de cryoconservation et de remise en vie de cellules souches mésenchymateuses et ainsi les cellules souches mésenchymateuses peuvent être stockées et remises en vie.