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PROCÉDÉ DE PRODUCTION D'UNE MATRICE NEURONALE
专利权人:
Gosudarstvennoye Obrazovatel'Noye Uchrezhdeniye Vysshyego Propyhsessional'Nogo Obrazovanija "Krasnojarskij Gosudarstvyennyj MyedItsinskij
发明人:
申请号:
EP11780875.8
公开号:
EP2557153A2
申请日:
2011.04.01
申请国别(地区):
EP
年份:
2013
代理人:
摘要:
Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung einer neuronalen Matrix unter Anwendung einer Kollagen-Chitosan-Unterlage und Nährböden zum Züchten von menschlichen embryonalen Stammzellen. Damit die Züchtungsqualität und -stabilität erhöht, die proliferative Aktivität der pluripotenten Stammzellen einschließlich ihrer Ausdifferenzierung in neuronale Zellen erhöht, die Immunogenität der Mikroumgebung der Zellen vermieden und die Erzeugung einer für die Transplantation geeigneten Matrix sichergestellt wird, sieht die Erfindung vor, dass die Biomasse der menschlichen embryonalen Stammzellen einer feederfreien hESKM-05-Linie zuerst in mit 0,1%iger Gelatinelösung beschichteten Flaschen angelagert wird, wobei ein koDMEM-Hauptboden verwendet und täglich gewechselt wird, dass der Hauptboden 10 % Serumersatzmittel SR, 100 µg/ml Kanamycinsulfat, 1 mM L-Glutamin-Lösung, 4 ng/ml eines Haupt-Wachstumfaktors von Fibroblasten (bFGF) und 1 mM einer essentiellen Aminosäure-Lösung enthält und dass die Biomasse danach mit Hilfe einer 0,5%igen Kollagenase-Lösung in Flaschen übertragen wird, welche eine vorbereitete Kollagen-Chitosan-Matrix in einem konditionierten Boden enthält, der von einer embryonalen neuronalen Zellkultur der Mäuse produziert wird oder aus einem Komplett-Nährboden unter Zugabe eines neuronalen N2-Faktors besteht, wobei der Boden alle drei Tage gewechselt wird.The invention relates to a method for producing a neuronal matrix using a collagen chitosan pad and culture media for growing human embryonic stem cells. In order to increase the quality and stability of growth, increase the proliferative activity of pluripotent stem cells including their differentiation into neuronal cells, avoid the immunogenicity of the microenvironment of the cells and ensure the generation of a matrix suitable for transplantation, the invention provides that the biomass of the human embryonic stem cells of a feeder-free hESKM-05 line are first deposited in 0.1% gelatin-coated bottle
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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