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一种VDR基因条件性敲除的floxed小鼠模型构建方法
- 专利权人:
- 复旦大学附属华山医院
- 发明人:
- 倪丽,陈靖
- 申请号：
- CN201910043975.5
- 公开号：
- CN110408653A
- 申请日:
- 2019.17.01
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2019
- 代理人:
- 摘要：
- 本发明属生物技术领域,涉及一种VDR基因条件性敲除的floxed小鼠模型构建方法。该方法利用基因打靶及ES细胞重组技术,利用细菌人工染色体在VDR基因外显子3的两侧分别放入Frt‑neo‑Frt‑loxP、loxP序列,构建VDR‑floxed载体,通过电击导入ES细胞;利用抗药性基因筛选出阳性ES细胞克隆后,经PCR及其产物测序确定,将阳性ES细胞移植至代孕的母鼠体内,产生含ES细胞来源的嵌合体小鼠;雄性嵌合体小鼠与雌性野生型小鼠互交F1代小鼠,经PCR及其产物测序确认获得含有Neo基因的VDR‑floxed杂合子小鼠;再将其与Flp小鼠杂交,获得去除neo基因VDR‑floxed杂合子小鼠。经实验验证本发明构建的VDR‑floxed小鼠模型,能导致VDR基因外显子3区域的敲除,导致VDR表达的缺失。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
