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一种利用高通量测序技术快速获得纳米抗体的方法
- 专利权人:
- 康众（北京）生物科技有限公司
- 发明人:
- 李福胜,庄文超,李洪利,覃海兰
- 申请号：
- CN201710124496.7
- 公开号：
- CN106866821A
- 申请日:
- 2017.03.03
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2017
- 代理人:
- 毛燕生
- 摘要：
- 本发明提供了一种利用高通量测序技术快速获得纳米抗体的方法，所述方法将流式细胞分选技术和高通量测序技术进行结合，其包括的步骤为：获得特定蛋白质W免疫和未免疫的羊驼外周血单个核细胞(PBMC)；采用流式细胞分选法获得针对特定蛋白质W特异的PBMC；提取未免疫、免疫后及分选后PBMC的总RNA，并反转录成cDNA；以所述的cDNA为模板，通过两步法PCR扩增获得抗特定蛋白质W的纳米抗体的DNA片段；构建纳米抗体的DNA片段的DNA文库，并进行高通量测序分析；分析所述纳米抗体的DNA片段的丰度；和将所述纳米抗体DNA片段的核苷酸序列构建入表达载体，并使所述纳米抗体DNA片段在合适的宿主中表达。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
