BERKOVSKIJ ARON LEONIDOVICH,Берковский Арон Леонидович,SUVOROV ALEKSANDR VLADIMIROVICH,Суворов Александр Владимирович,GOLUBEV EVGENIJ MIKHAJLOVICH,Голубев Евгений Михайлович,SERGEEVA ELENA VLADIMIROVN
申请号:
RU2013155894
公开号:
RU2556804C2
申请日:
2013.12.17
申请国别(地区):
RU
年份:
2015
代理人:
摘要:
FIELD: chemistry.SUBSTANCE: invention relates to biotechnology of obtaining haemostatic medications. Claimed is method of separating purified fibrinogen concentrate, free of viruses and ballast proteins. Solubilisation of cryoprecipitate of fresh frozen human plasma is realised. Fibrinogen is precipitated with 20-30% PEG solution. Separated sediment is dissolved in buffer with sodium citrate and sodium chloride. Virus inactivation of solution by solvent-detergent method is carried out in presence of 1-3% Tween-80 and 0.1-1.5% of tri-n-butylphoshate. Obtained concentrate is purified from products of virus inactivation and solvent-detergents by triple extraction with liquid paraffin. After that, obtained fibrinogen concentrate is re-precipitated with 1.0-2.5 M glycine solution. Sterile filtration and lyophilic drying with further corking of lyophilisate under vacuum and thermal inactivation are performed.EFFECT: invention makes it possible to obtained lyophilised form of fibrinogen concentrate with approximately 55% output.Изобретение относится к биотехнологии получения гемостатических препаратов. Предложен способ выделения очищенного концентрата фибриногена, свободного от вирусов и балластных белков. Осуществляют солюбилизацию криопреципитата свежезамороженной плазмы человека. Осаждают фибриноген 20-30% раствором ПЭГ. Растворяют отобранный осадок в буфере с цитратом натрия и хлоридом натрия. Проводят вирусную инактивацию раствора сольвент-детергентным методом в присутствии 1-3% Tween-80 и 0,1-1,5% три-н-бутилфосфата. Очищают полученный концентрат от продуктов вирусной инактивации и сольвент-детергентов экстракцией вазелиновым маслом, проводимой трехкратно. Далее переосаждают полученный концентрат фибриногена 1,0-2,5 М раствором глицина. Осуществляют стерильную фильтрацию и лиофильное высушивание с последующим укупориванием лиофилизата под вакуумом и термоинактивацией. Изобретение позволяет получать лиофилизированную форму концентрата фибриногена с выходом около 55%.