The present invention relates to a method for expressing water solubility of codon-optimized transmembrane receptor activator of nuclear factor (NF)-kB ligand (mRANKL) in E. coli, and to optimization of expression through a response-surface analysis scheme. In particular, provided is a codon-optimized RANKL gene represented by SEQ ID NO: 1. Moreover, provided are a recombinant expression vector including the codon-optimized RANKL gene, and a recombinant microorganism transformed by the recombinant expression vector. Furthermore, provided is a method for producing an RANKL protein, wherein the method comprises a step of culturing the recombinant microorganism. In addition, the inventors have continuously induced physiological numbers of M cells and immunity cells by administrating mRANKL through a penetration scheme, and have suggested a new strategy for improving efficiency of oral vaccines by continuously transferring M cell-targeted antigens through a mucosal adhesive and pH sensitive oral delivery system.COPYRIGHT KIPO 2016본 발명은 코돈 최적화된 막 관통 RANKL(transmembrane receptor activator of nuclear factor (NF)-kB ligand mRANKL)의 대장균 내 수용성 발현 방법 및 반응표면분석법을 통한 발현 최적화에 관한 것으로서, 상세하게는 서열번호 1로 표시되는 코돈 최적화된 핵 인자-κB 리간드 수용체 활성화제(Receptor activator of nuclear factor (NF)-κB ligand RANKL) 유전자를 제공한다. 또한, 상기 코돈 최적화된 RANKL 유전자를 포함하는 재조합 발현벡터 및 상기 재조합 발현벡터로 형질전환된 재조합 미생물을 제공한다. 또한, 상기 재조합 미생물을 배양하는 단계를 포함하는 RANKL 단백질 생산방법을 제공한다. 또한, 본 발명자들은 mRANKL의 침투성 방법의 투여를 통해 M 세포 및 면역 세포의 생리학적 수를 연속적으로 유도하고, 점막부착성 및 pH 민감성 경구 전달 시스템을 통한 M 세포 표적 항원의 연속적인 전달을 통해 경구 백신의 효율을 향상시키기 위한 새로운 전략을 제시하였다.