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一种提高细菌转化效率的方法
- 专利权人:
- 南京农业大学
- 发明人:
- 康福星,杨兵,高彦征
- 申请号：
- CN201611181649.3
- 公开号：
- CN106755039A
- 申请日:
- 2016.12.20
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2017
- 代理人:
- 谷庆红
- 摘要：
- 本发明公开了一种提高细菌转化效率的方法，主要包括以下步骤：1)受体菌的培养；2)细胞EPS的去除；3)感受态细胞的制备；4)转化：感受态细胞悬液，加入质粒DNA溶液，冰上放置30分钟；热击后迅速置于冰上冷却，加入LB液体培养基，混匀后37℃振荡培养1小时，使细菌恢复正常生长状态，并表达质粒编码的抗生素抗性基因，摇匀后吸取100l涂布于含抗生素的筛选平板上，正面向上放置半小时，待菌液完全被培养基吸收后倒置培养皿，37℃培养16‑24小时；根据生长情况对菌落数进行计数。本发明具有转化效率高、操作步骤简单、温度和细菌生长条件要求低、革兰氏阴性菌和阳性菌通用的特点，对分子生物学与基因工程技术领域具有重要的意义。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
