PROBLEM TO BE SOLVED: To provide novel highly sialylated Fc-EPO fusion proteins that comprises modifications in the Fc-portion as well as in the EPO-portion and has improved pharmacokinetics.SOLUTION: A purified dimeric fusion protein essentially consists of a dimeric Fc portion of a human IgG molecule comprising a hinge region, a CH2 and a CH3 domain, and human erythropoietin (EPO), wherein each chain of the dimeric Fc portion is linked via its C-terminus directly or via a linker peptide to the N-terminus of an EPO molecule. The fusion protein has the following properties: (i) the molecule is highly sialylated by comprising 15-28 sialic acid residues (ii) the CH2 domain derives from human IgG2 and is modified by replacing Phe and Asn within the Gln-Phe-Asn-Ser sequence track of the CH2 domain with Ala and Asn, thus forming the sequence Gln-Ala-Gln-Ser within the CH2 domain and (iii) the Leu-Ser-Leu-Ser amino acid sequence track near the C-terminus of the CH3 domain is replaced with Ala-Thr-Ala-Thr.COPYRIGHT: (C)2012,JPO&INPIT【課題】Fc部分に加えEPO部分に改変を含み、改善された薬物動態を有する高度にシアル酸化されたFc-EPO融合タンパク質を提供する。【解決手段】ヒンジ領域、CH2及びCH3ドメインを含むヒトIgG分子の二量体Fc部分並びにヒトエリスロポエチン(EPO)から本質的になる精製された二量体融合タンパク質であって、前記二量体Fc部分の各鎖はそのC-末端でEPO分子のN-末端へ直接又はリンカーペプチドを介して連結しており、下記の特徴を有する前記二量体融合タンパク質:(i) 15~28個のシアル酸残基を有することにより高度にシアル酸化されている;(ii) CH2領域がヒトIgG2に由来し、前記CH2領域中のGln-Phe-Asn-Ser配列内のPheおよびAsnがAlaおよびAsnで置換され、その結果前記CH2領域内に配列Gln-Ala-Gln-Serが形成されることによって前記CH2領域が改変されている;および、(iii)CH3ドメインのC-末端近傍のLeu-Ser-Leu-Serアミノ酸配列が、Ala-Thr-Ala-Thrで置換されている。【選択図】なし
