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一种基于家蚕-杆状病毒系统制备人髓过氧化物酶的方法
- 专利权人:
- 江苏大学;中山瑞福医疗器械科技有限公司
- 发明人:
- 陈俏梅,周亚竟,孙祥明,张茜,张倩,陈焰,陈慧卿,陈克平,傅海龙,王红勋
- 申请号:
- CN201510553322.3
- 公开号:
- CN105112382A
- 申请日:
- 2015.09.01
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2015
- 代理人:
- 摘要:
- 本发明公开了一种基于家蚕-杆状病毒系统制备人髓过氧化物酶的方法,涉及基因工程和生物技术领域。将完整的人髓过氧化物酶MPO的cDNA克隆到自身含6个组氨酸的供体质粒上,获得含人MPO基因的重组供体质粒;在大肠杆菌BmDH10Bac中和家蚕杆状病毒基因组杆粒于转座子上发生转座,通过蓝、白斑筛选出带有目的基因的克隆,随后在家蚕细胞中制备含人MPO基因的重组病毒;用获得的含目的基因的重组病毒感染宿主昆虫家蚕,同时给家蚕添加一定量的血红素前体;收集家蚕幼虫的体液,经超声波裂解,下进行高速离心,收集的上清进行分离纯化,最终获得目的产物。本发明利用家蚕作为生物反应器,大规模、低成本、高效率地制备重组人MPO的方法。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/