本发明涉及一种微小隐孢子虫Gp40/15蛋白的免疫优势T细胞表位多肽,该表位多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。该多肽与H‑2Kb具有较高的体外亲和力且具有一定的稳定性。涉及一种重组腺病毒载体疫苗,该疫苗表达微小隐孢子虫表面糖蛋白gp40/15核苷酸,病毒载体疫苗经小鼠免疫后,能显著刺激小鼠的T细胞免疫应答。其所诱导CD8+T cell产生的IFN‑gamma,与各种阴性对照比较,P<0.01,具有显著差异。多肽免疫组特异性双阳性T细胞比例明显高于阴性对照,说明gp40/15蛋白及其相关多肽具有相应的生物免疫学功能,成为新型的微小隐孢子虫疾病表位疫苗或腺病毒载体疫苗。