A method for producing a therapeutic agent for cartilage damage according to the present invention is a method for producing a medicament for treating cartilage damage comprising culturing a mesenchymal stem cell (A) in a serum-free medium A containing FGF, PDGF, TGF-, HGF, EGF, at least one phospholipid and at least one fatty acid And a mixing step of mixing the mesenchymal stem cells, the isotonic preservative, and the cytoprotective agent after the proliferation step, and by this production method, preferably regenerating cartilage tissue To provide a therapeutic agent for cartilage damage.本発明に係る軟骨損傷治療剤の製造方法は、FGF、PDGF、TGF-β、HGF、EGF、少なくとも1つのリン脂質、及び、少なくとも1つの脂肪酸を含有する無血清培地Aにおいて、間葉系幹細胞を増殖させる増殖工程と、上記増殖工程後の間葉系幹細胞、等張保存剤、及び、細胞保護剤を混合する混合工程とを包含しており、この製造方法によって、好適に軟骨組織を再生する軟骨損傷治療剤が提供される。