Obshchestvo s ogranichennoj otvetstvennostyu "NekstGen"
发明人:
Kiselev Sergej Lvovich (RU),Киселев Сергей Львович (RU),Kiselev Sergej Lvovich,Киселев Сергей Львович
申请号：
RU2015119768
公开号：
RU0002612497C2
申请日:
2015.05.26
申请国别(地区):
RU
年份:
2017
代理人:
摘要：
FIELD: biotechnology.SUBSTANCE: way to extend the lifetime of vegf transgene mRNA in a mammal cell transfected with the genetic structure. Point deletions of 3'noncoding region of the vascular endothelial growth factor (Vegf) gene are performed, at that, the deleted nucleotide is not replaced or replaced by cytosine in guanine or adenine substitution points. Then, mRNA lifetime is determined for each deletion. Data is analyzed and a genetic structure is designed, comprising 3'noncoding region with aggregated single deletions and/or cytosine substitutions, which showed the best results in terms of mRNA lifetime extension. In addition, versions of plasmid DNA, constructed to implement the said method, and vegf transgene mRNA obtained by plasmid DNA transcription, are proposed. The invention also relates to plasmid DNA aplication, including its use as part of a pharmaceutical composition for tissue regeneration.EFFECT: invention allows to increase overall therapeutic vegf protein production due to an increased mRNA lifetime achieved by introduction of optimal changes in the vegf gene 3'UTR sequence.8 cl, 9 dwg, 2 tbl, 2 exИзобретение относится к области биохимии. Предложен способ продления времени жизни мРНК трансгена vegf в клетке млекопитающего, трансфицированной генной конструкцией. Проводят точечные делеции в 3'некодирующей области гена фактора роста эндотелия сосудов (vegf), при этом делетированный нуклеотид не заменяется либо заменяется на цитозин в точках замещения гуанина или аденина. Затем определяют время жизни мРНК при каждой делеции. Сведения анализируют и конструируют генную конструкцию, содержащую 3'некодирующую область с совокупностью одиночных делеций и/или замен на цитозин, показавших наилучший результат по продлению жизни мРНК. Кроме того, предложены варианты плазмидной ДНК, сконструированной для осуществления указанного способа, и мРНК трансгена vegf, полученная в результате транскрипции плазмидной ДНК. Также изобретение относится к применению плазми
