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一种无选择标记基因的成纤维细胞阳性单克隆的制备方法
- 专利权人:
- 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
- 发明人:
- 唐中林,谢旭茹,李奎,白立景,侯欣华
- 申请号：
- CN201410843141.X
- 公开号：
- CN104561094A
- 申请日:
- 2014.12.30
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2015
- 代理人:
- 关畅`陈晓庆
- 摘要：
- 本发明提供了一种无选择标记基因的成纤维细胞阳性单克隆的制备方法。包括如下步骤：(1)将外源基因连入骨架载体中，得到重组载体；所述骨架载体只含有一个选择标记基因；(2)用所述限制性内切酶A酶切所述重组载体，得到线性化重组载体；酶切时使所述重组载体中的选择标记基因无法表达；(3)将所述线性化重组载体转化出发成纤维细胞，得到转化后的成纤维细胞；(4)将所述转化后的成纤维细胞进行梯度稀释，培养并鉴定后得到成纤维细胞阳性单克隆。实验证明：通过本发明的方法可获得稳定转入目的片段的无选择标记基因的成纤维细胞阳性单克隆，为今后以原代成纤维细胞作为转染受体、筛选无选择标记基因阳性克隆的实验提供了研究基础。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
