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RNF213基因完整敲除纯合子斑马鱼的制备方法和用途
- 专利权人:
- 中山大学附属第一医院
- 发明人:
- 盛文利,林晶,杨蜀岚,孙逊沙,温骏,梁杰,张晶晶
- 申请号：
- CN201910592731.2
- 公开号：
- CN110396525A
- 申请日:
- 2019.03.07
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2019
- 代理人:
- 摘要：
- 本发明公开了一种rnf213a基因完整敲除斑马鱼突变体的制备及其应用;设计针对斑马鱼rnf213a基因的TALEN序列;构建其左右臂质粒,并体外转录出相应的mRNA;将TALEN左右臂mRNA混合并注射到斑马鱼胚胎中;注射后的胚胎养至F0成鱼与野生型成鱼交配,将携带有rnf213a基因突变的胚胎养至F1成鱼;F1代鱼剪尾基因型鉴定发现存在两种杂合子基因型:+2bp及‑7bp;将杂合子与野生型成鱼外交3代,净化其遗传背景后,再将同种基因型的杂合子杂交得到纯合子两种基因型:+2bp及‑7bp。纯合子与纯合子杂交得到的胚胎进行表型观察发现存在与人相似的烟雾病表型及海绵状血管瘤表型。本发明通过TALEN基因编辑技术,能够快速高效的建立rnf213a基因完整敲斑马鱼品系,利用该模型能够开展针对烟雾病或/和海绵状血管瘤的药物筛选工作。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
