The present invention encompasses engineered nucleases which recognize and cleave a recognition sequence within the first exon of the human T cell receptor (TCR) alpha constant region gene. The engineered meganucleases can exhibit at least one optimized characteristic, such as enhanced (i.e., increased) specificity or efficiency of cleavage, when compared to the first-generation meganuclease TRC l-2x.87EE. The present invention also encompasses methods of using such engineered nucleases to make genetically-modified cells, and the use of such cells in a pharmaceutical composition and in methods for treating diseases, such as cancer.La présente invention concerne des nucléases modifiées qui reconnaissent et clivent une séquence de reconnaissance au sein du premier exon d'un gène de région constante alpha du récepteur des lymphocytes T humains. Les méganucléases modifiées peuvent présenter au moins une caractéristique optimisée, telle qu'une spécificité améliorée (augmentée) ou une efficacité de clivage, par rapport à la méganucléase TRC l-2x.87EE de première génération. La présente invention concerne également des procédés d'utilisation de telles nucléases modifiées pour produire des cellules génétiquement modifiées, et l'utilisation de telles cellules dans une composition pharmaceutique et dans des méthodes de traitement de maladies, telles que le cancer.
