The present invention relates to the construction of a new class of Targeted Secretion Inhibitors (TSIs), which comprise a non-cytotoxic protease, translocation peptide and a targeting moiety peptide, wherein the targeting moiety peptide has a free N-terminal domain and a free C-terminal domain； to a single-chain fusion protein precursor thereof, and to a method of activating said single-chain fusion protein precursor.Una proteína de fusión de polipéptido monocatenario, que comprende: (a) una proteasa no citotóxica capaz de romper una proteína del aparato de fusión exocítica de una célula diana； (b) un resto de transporte dirigido que es capaz de unirse a un sitio de unión sobre la célula diana, y dicho sitio diana es capaz de sufrir una endocitosis para ser incorporado en un endosoma dentro de la célula diana； (c) un dominio de translocación que es capaz de translocar la proteasa desde el interior de un endosoma, a través de la membrana endosómica y hacia el citosol de la célula diana； (d) un primer sitio de ruptura de proteasas, en cuyo sitio la proteína de fusión puede ser rota por una primera proteasa, en la que el primer sitio de ruptura de proteasas está localizado entre la proteasa no citotóxica y el dominio de translocación； (e) un segundo sitio de ruptura de proteasas, en cuyo sitio la proteína de fusión puede ser rota por una segunda proteasa, en la que el segundo sitio de ruptura de proteasas está localizado entre el dominio de translocación y el resto de transporte dirigido； y (f) un enlace covalente entre el resto de transporte dirigido y el dominio de translocación, en la que, después de la ruptura proteolítica en el segundo sitio de ruptura de proteasas, el resto de transporte dirigido permanece unido al dominio de translocación por dicho enlace covalente； en la que, después de la ruptura en el primer y segundo sitio de ruptura de proteasas, el resto de transporte dirigido es capaz de interaccionar con el sitio de unión sobre la célula diana a través
