本发明具体涉及到一种牛支原体MbovP579蛋白及其应用。所述的蛋白是从牛支原体HB0801基因组中克隆表达获得,是一种未知功能的特异性免疫原性蛋白。以牛支原体HB0801基因组为模板,克隆Mbov_579基因,根据大肠杆菌的密码子偏爱性,对Mbov_579基因进行修饰,将牛支原体色氨酸密码子UGA突变成大肠杆菌中编码色氨酸的密码子UGG,最终获得在大肠杆菌中表达的重组rMbovP579。本发明的蛋白的基因的核苷酸序列是SEQ ID NO:13中1-2187位碱基所示的序列,其蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID NO:14所示。该重组蛋白可作为牛支原体感染和疫苗免疫诊断试剂盒中的抗原蛋白。