重组人成纤维细胞生长因子‑16的克隆、表达和应用及其生物学活性的测定方法
- 专利权人:
- 温州医科大学;李校堃
- 发明人:
- 田海山,姜潮,程继亮,许诺
- 申请号:
- CN201710340788.4
- 公开号:
- CN107012150A
- 申请日:
- 2017.05.12
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2017
- 代理人:
- 摘要:
- 本发明提供了一种重组人成纤维细胞生长因子‑16的克隆、表达和应用及其生物学活性的测定方法,涉及生物医药的技术领域。本发明通过对hFGF16基因进行优化和重组菌株构建,获得高效稳定表达的工程菌株;通过建立高密度培养方法,使rhFGF16蛋白的表达水平达到菌体总蛋白的30%以上。通过温度、培养基、诱导剂及添加方式的优化,增加可溶性表达蛋白的含量,并建立了可溶性蛋白和包涵体形式表达蛋白的纯化方法。另外,本发明还建立了用NIH 3T3、H460及H9C2细胞株进行rhFGF16蛋白促增殖作用活性的测定方法。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心