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一种靶向SRSF6的慢病毒干扰载体的构建及其在结直肠癌治疗中的应用
- 专利权人:
- 浙江大学
- 发明人:
- 张红河,孔建鲁,来茂德
- 申请号：
- CN201510268810.X
- 公开号：
- CN104975044B
- 申请日:
- 2015.05.22
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2018
- 代理人:
- 摘要：
- 本发明公开了抑制SRSF6基因表达的shRNA、慢病毒表达载体及其构建方法,所述的shRNA序列为F:5‐CCGGCGTACAGAATACAGGC TTATTCTCGAGAATAAGCCTGTATTCTGTACGTTTTTG‐3,R:5‐AATTCAAAAACGTACAGAATACAGGCTTAT TCTCGAGAATAAGCCTGTATTCTGTACG‐3;所述慢病毒表达载体是将上述的shRNA插入载体质粒PLKO.1中,构建PLKO.1‐SRSF6‐shRNA;载体测序验证正确后将其和包装质粒PSPAX2和PMD2.G中转染HEK293T细胞获得慢病毒悬液;用此悬液去感染结直肠癌细胞,然后用嘌呤霉素筛选验证病毒包装是否成功;Western Blot验证其能明显降低SRSF6的表达水平;并能显著降低结直肠癌细胞的增殖能力和迁移侵袭能力;其中SRSF6对肿瘤细胞迁移侵袭能力的作用的研究尚数首次。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
