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一种高效筛查G蛋白-偶联受体表达的融合基因构建方法
- 专利权人:
- 华东师范大学
- 发明人:
- 赵欣,孙超
- 申请号：
- CN201510434091.4
- 公开号：
- CN105154470A
- 申请日:
- 2015.07.22
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2015
- 代理人:
- 徐筱梅`张翔
- 摘要：
- 本发明涉及分子影像学和细胞生物学领域，公开了一种筛查G蛋白-偶联受体GPCR表达的融合基因构建方法，该方法在G蛋白-偶联受体GPCR的前段插入人视紫红质Rhodopsin起始端的33个残基以及相应的蛋白酶切位点，在GPCR的末端插入His（5个残基）或者1D4（9个残基）抗原表位、相应的酶切位点，以及绿色荧光蛋白eGFP，构建Rho33-protease-GPCR-1D4-protease-eGFP；其中Rho33能够有效的引导GPCR插膜，增加功能分子比例，提高蛋白产量；1D4表位用于Western Blot检测和蛋白纯化；eGFP是筛选鉴定的主要指标；酶切位点可以切掉目的蛋白以外部分，维持蛋白功能。本发明有效提高功能蛋白比例，提高蛋白产量，后期通过蛋白酶切可以完全消除融合蛋白的影响，兼具高效，便捷的优点。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
