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CRISPR/Cas9靶向敲除人PDCD1L1基因及其特异性gRNA
专利权人:
SHENZHEN BIOCAN TECHNOLOGIES CO., LTD.;深圳市博奥康生物科技有限公司
发明人:
MAO, Jiyan,毛吉炎
申请号:
CNCN2018/091723
公开号:
WO2019/237393A1
申请日:
2018.06.16
申请国别(地区):
CN
年份:
2019
代理人:
摘要:
Provided are CRISPR/Cas9 system-based directed RNA(gRNA) sequences and combinations thereof in preparation of gRNA for specifically targeted knockout of the human PDCD1L1 gene. The gRNA is designed according to a CRISPR/Cas9 design principle, the sequence of the gRNA is as shown in SEQ ID NO.1, and the gRNA is constructed on a px459 vector. In Jurkat cells, the CRISPR/Cas9 system directed by the gRNA and combination thereof can effectively knock out the human PDCD1L1 gene. The prepared gRNA can accurately target the human PDCD1L1 gene and implement a gene knockout. The preparation method is simple in operation, the gRNA is good in targeting, and knockout efficiency of the CRISPR/Cas9 system is high.La présente invention concerne des séquences d'ARN (ARNg) dirigées basées sur le système CRISPR/Cas9 et leurs combinaisons dans la préparation d'ARNg pour la désactivation spécifiquement ciblée du gène PDCD1L1 humain. L'ARNg est conçu en fonction d'un principe de conception CRISPR/Cas9, la séquence de l'ARNg est telle que montrée dans SEQ ID no : 1, et l'ARNg est construit sur un vecteur px459. Dans les cellules Jurkat, le système CRISPR/Cas9 dirigé par l'ARNg et leur combinaison peuvent efficacement désactiver le gène PDCD1L1 humain. L'ARNg préparé peut précisément cibler le gène PDCD1L1 humain et mettre en œuvre une inactivation génique. Le procédé de préparation est de fonctionnement simple, l'ARNg est bon dans le ciblage, et l'efficacité de désactivation du système CRISPR/Cas9 est élevée.提供基于CRISPR/Cas9系统的导向RNA(gRNA)序列及其组合在用于特异性靶向敲除人PDCD1L1基因的gRNA。根据CRISPR/Cas9的设计原则设计了gRNA,其序列如SEQ ID NO.1所示,并且将其构建在px459载体上。在Jurkat细胞中利用这条gRNA及其组合指导的CRISPR/Cas9系统,可以有效地敲除人PDCD1L1基因。利用制备的gRNA能够精确靶向人PDCD1L1基因并且实现基因敲除。该制备方法操作简单、gRNA靶向性好,CRISPR/Cas9系统的敲除效率高。
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/
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