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一种Brevinin-2GUb多肽的重组表达方法及应用
- 专利权人:
- 华南理工大学
- 发明人:
- 王菊芳,林静莲,马毅
- 申请号:
- CN201910427262.9
- 公开号:
- CN110205336A
- 申请日:
- 2019.22.05
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2019
- 代理人:
- 摘要:
- 本发明属于基因工程和生物制药领域,公开了一种Brevinin‑2GUb多肽的重组表达方法,包括:(1)将Brevinin‑2GUb基因插入到含有硫氧还蛋白、组蛋白标签及肠激酶酶切位点的pET32系列载体中获得重组表达载体;(2)将重组表达载体转化至大肠杆菌获得重组表达工程菌株;(3)将工程菌株进行诱导表达,离心收集菌体、破碎,离心获得上清液,对上清液进行镍离子亲和层析获得融合蛋白;(4)将融合蛋白用肠激酶酶切缓冲液透析,然后用肠激酶对融合蛋白进行切割,再进行镍离子亲和层析后浓缩,获得不带标签的目的多肽。该多肽在低浓度下即可对INS‑1细胞具有显著促胰岛素分泌活性,可用于制备降糖多肽药物。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/