The present specification provides a method of forming a cell, comprising the steps of: (a) forming a first cell layer on a first substrate having a melting point at a temperature of any point between 0 ° C. and 30 ° C. or converted from hydrophobic to hydrophilic； (b) forming a second cell layer on a second substrate degraded by an enzyme； (c) contacting said first cell layer with said second cell layer； (d) optionally removing the first substrate by providing a temperature below the melting point of the first substrate or a temperature at which the first substrate is converted to hydrophilic； And (e) selectively removing the second substrate by contacting the second substrate with a solution containing an enzyme. The present invention relates to a method for manufacturing a multilayer cell sheet and a multilayer cell sheet prepared using the same. .본 명세서는 (a) 0 ℃ 내지 30 ℃ 중 어느 한 지점의 온도에서 녹는점을 가지거나 소수성에서 친수성으로 변환되는 제1 기재 상에 제1 세포층을 형성하는 단계； (b) 효소에 의하여 분해되는 제2 기재 상에 제2 세포층을 형성하는 단계； (c) 상기 제1 세포층과 상기 제2 세포층을 접촉시키는 단계； (d) 상기 제1 기재의 녹는점 이하의 온도 또는 상기 제1 기재가 친수성으로 변환되는 온도를 제공하여, 상기 제1 기재를 선택적으로 제거하는 단계； 및 (e) 효소를 포함하는 용액에 상기 제2 기재를 접촉시켜 상기 제2 기재를 선택적으로 제거하는 단계；를 포함하는, 다층 세포 시트의 제조방법 및 이를 이용하여 제조된 다층 세포 시트에 관한 것이다.
