一种酸响应的一氧化氮/活性氧纳米发生器及其制备方法,酸响应的一氧化氮/活性氧纳米发生器为负载NO供体的具有酸响应的胶束;NO供体选自Roussin’s black salt、Roussin’s red salt、陆森红酯、亚硝酸叔丁酯、亚硝基硫醇和硝基苯中的一种或两种以上的混合物;具有酸响应的胶束为乙二醇‑β酰胺‑原卟啉胶束;制备方法为:(1)将NO供体解于有机溶剂中,加入光敏剂衍生物,室温下通氮气反应得到活化NO供体;(2)将酸响应单体、光敏剂和甲氧基聚乙二醇胺溶于有机溶剂中反应获得反应溶液;透析除去溶剂,冷冻干燥,制成酸响应纳米胶束;(3)将活化NO供体包载入酸响应纳米胶束中。本发明的酸响应的一氧化氮/活性氧纳米发生器,其特异性强、生物膜靶向效果好,并有很好的安全性和生物相容性。