JAKOVLEV RUSLAN JUREVICH,Яковлев Руслан Юрьевич,RODINA ELENA VALEREVNA,Родина Елена Валерьевна,VALUEVA ANASTASIJA VIKTOROVNA,Валуева Анастасия Викторовна,VOROBEVA NATALIJA NIKOLAEVNA,Воробьева Наталия
申请号：
RU2013158051/15
公开号：
RU0002542411C1
申请日:
2013.12.26
申请国别(地区):
RU
年份:
2015
代理人:
摘要：
FIELD: chemistry.SUBSTANCE: conjugate represents nanodiamond particles with size 2-10 nm with pyrophosphorase, immobilised on them by means of linker, containing amino or amide groups. Content of pyrophosphatase constitutes 0.1-1 mg per 1 mg of nanodiamond, with specific activity of pyrophosphatase constituting to 95±5% of native pyrophosphatase activity. method of conjugate obtaining includes dissolution of nanodiamond with grafted hexamethylenediamine and/or nanodiamond aminated with ammonia in water, successive addition of water buffer solution HEPES with pH 7-8, magnesium chloride, sodium fluoride, sodium pyrophosphate, pyriphosphatase, and glutaraldehyde. After that, obtained mixture is exposed for 0.5-12 h, centrifuged, washed with water buffer solution Tris-HCl and dried.EFFECT: obtaining conjugate of nanodiamond with pyrophosphatase, possessing increased stability.3 cl, 1 tbl, 2 dwg, 2 exИзобретение относится к области фармации и медицины и касается конъюгата наноалмаза с пирофосфатазой для доставки пирофосфатазы в организм и способа его получения. Конъюгат представляет собой частицы наноалмаза размером 2-10 нм с иммобилизованной на них посредством линкера, содержащего амино- или амидные группы, пирофосфатазой. Содержание пирофосфатазы составляет 0,1-1 мг на 1 мг наноалмаза, и удельная активность пирофосфатазы составляет до 95±5% от активности нативной пирофосфатазы. Способ получения конъюгата включает растворение наноалмаза с привитым гексаметилендиамином и/или аминированного аммиаком наноалмаза в воде, последовательное добавление водного буферного раствора HEPES с рН 7-8, хлорида магния, фторида натрия, пирофосфата натрия, пирофосфатазы и глутарового альдегида. Далее выдерживают полученную смесь в течение 0,5-12 ч, центрифугируют, промывают водным буферным раствором Tris-HCl и сушат. Изобретение обеспечивает получение конъюгата наноалмаза с пирофосфатазой, обладающего повышенной стабильностью. 2 н. и 1 з.п. ф-лы, 1 табл., 2 ил., 2 пр.
