A method of producing a selectable marker gene-free plasmid by culturing a plasmid containing a selectable marker gene flanked by site specific recombinase target sites in a host cell environment incapable of effecting recombination between the site specific recombinase target sites and subsequently culturing the plasmid in another host cell environment which is capable of effecting recombination between the site specific recombinase target sites, so that the selectable marker gene is excised. Uses of plasmids produced by the method for the production of recombinant protein for therapeutic and vaccine purposes, production of therapeutic DNA and DNA vaccines and delivery of recombinant protein and DNA to a patient using live bacterial vectors.部位特異的リコンビナーゼ標的部位間の組換えを起こすことができない宿主細胞環境において、部位特異的リコンビナーゼ標的部位に隣接した選択可能なマーカー遺伝子を含むプラスミドを培養するステップ、および続いて、選択可能なマーカー遺伝子が切除されるように、部位特異的リコンビナーゼ標的部位間の組換えを起こすことができる別の宿主細胞環境においてプラスミドを培養するステップによって、選択可能なマーカー遺伝子を含まないプラスミドを作製する方法。治療用およびワクチン用の組換えタンパク質を産生するための方法によって作製されたプラスミドの使用、治療用ＤＮＡおよびＤＮＡワクチンの生産、ならびに生きた細菌ベクターを用いた組換えタンパク質およびＤＮＡの患者への送達。
