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含有IGF2b基因的慢病毒载体的构建方法
- 专利权人:
- 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心
- 发明人:
- 袁新华,董在杰,徐跑
- 申请号：
- CN201110155364.3
- 公开号：
- CN102250912A
- 申请日:
- 2011.06.10
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2011
- 代理人:
- 史静
- 摘要：
- 本发明涉及一种含有IGF2b基因的慢病毒载体的构建方法，包括以下步骤：获取鲤的肝脏组织，提取RNA，后反转录为cDNA，根据基因库中公布的鲤IGF2b基因序列开放阅读框设计引物；在目的片段的5’端和3’端设计内切酶，测序检测是IGF2b基因后，用BamHI和NheI双酶切含有IGF2b基因的PCR回收产物及载体pLenti6.3-IRES-EGFP，然后回收酶切后的载体pLenti6.3-IRES-EGFP及IGF2b基因片段；将酶切回收的IGF2b基因片段与pLenti6.3-IRES-EGFP连接，获得含有IGF2b基因的慢病毒载体。本发明的有益效果为：无毒性且不易诱发宿主免疫反应，安全性较好，不仅能感染分裂细胞，且能转染终末分化细胞和非分裂细胞；是获取转基因鲤的一项关键技术，可在短期内确定具有目的基因的品系，缩短鱼类育种时间。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
