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一种提取鱼类肠道微生物基因组DNA的高温复合法
- 专利权人:
- 天津农学院
- 发明人:
- 孙敬锋,韩卓然,吕爱军,石洪玥,胡秀彩
- 申请号：
- CN201610086539.2
- 公开号：
- CN105483120A
- 申请日:
- 2016.02.16
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2016
- 代理人:
- 谢宇强
- 摘要：
- 本发明公开了一种提取鱼类肠道微生物基因组DNA的高温复合法，首先，同时应用溶菌酶法与超声波法，使鱼类肠道各类群微生物适当破壁。超声波物理破壁的条件为150-250w，超声2-3s，间隔5s，循环50-60次。其次，将超声波处理后的样品与溶菌酶在55-65℃温度的水浴恒温振荡器中共同孵育30min，与RNase A共同孵育的温度为27-32℃。此方法利用恰当的温和超声波条件使各种微生物适当破壁，避免基因组DNA断裂降解。通过设置溶菌酶、RNase A与样品孵育的特定温度范围，即可以提高溶菌酶的裂解效果，又可避免组织和细胞中DNA酶降解基因组DNA。操作简单、提取的基因组DNA完整、降解率低，根据提取的DNA所鉴定出的微生物种类能够真实反映鱼类肠道微生物组成结构。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
