Disclosed is a chromatographic method for separating a mixture of compounds having ionizable groups using a mobile phase comprising (a) a first mobile phase component comprising an aqueous buffer system and an organic solvent mixture miscible with water, and (b) a second mobile phase component comprising an aqueous buffer system and an organic solvent mixture miscible with water, wherein the buffer system and the solvent mixture in the first mobile phase component are different from the buffer system and the solvent mixture in the second mobile phase component and the ratio of the first mobile phase component to the second mobile phase component is varied during the separation. The method can be used for the separation of vancomycin and its degradation products.L'invention concerne un procédé de chromatographie qui permet de séparer un mélange de constituants ayant des groupes pouvant être ionisés à l'aide d'une phase mobile comprenant (a) un premier constituant de phase mobile comprenant un système tampon aqueux et un mélange de solvants organiques miscible avec l'eau, et (b) un second constituant de phase mobile comprenant un système tampon aqueux et un mélange de solvants organiques miscible avec l'eau, le système tampon et le mélange de solvants du premier constituant de phase mobile étant différents du système tampon et du mélange de solvants du second constituant de phase mobile, et le rapport du premier constituant de phase mobile au second constituant de phase mobile étant modifié pendant la séparation. Le procédé peut être utilisé pour la séparation de la vancomycine et de ses produits de dégradation.
