FEDERALNOE GOSUDARSTVENNOE BJUDZHETNOE UCHREZHDENIE NAUKI INSTITUT BIOLOGII MORJA IM. A.V. ZHIRMUNSKOGO DALNEVOSTOCHNOGO OTDELENIJA ROSSIJSKOJ AKADEMII NAUK
发明人:
BORODA ANDREJ VIKTOROVICH,Борода Андрей Викторович,AJZDAJCHER NINA ALEKSANDROVNA,Айздайчер Нина Александровна,ODINTSOVA NEHLIJA ADOLFOVNA,Одинцова Нэлия Адольфовна
申请号：
RU2012124560/13
公开号：
RU0002496318C1
申请日:
2012.06.15
申请国别(地区):
RU
年份:
2013
代理人:
摘要：
FIELD: agriculture.SUBSTANCE: invention relates to the field of cryobiology, cell biology, marine biotechnology and hydrobiology. Processing of marine microalgae cells is carried out with cryoprotective mixture containing penetrating and non-penetrating cryoprotectant and a nutrient medium. Freezing is carried out, followed by preservation in liquid nitrogen. Sterile seawater is taken as the nutrient medium in the following ratio of components, wt %: penetrating cryoprotectant 5-7.5%, non-penetrating cryoprotectant 1.5-3%, sterile sea water - the rest. Prior to freezing, the cells of marine microalgae are incubated in the ice bath for at least 10 minutes. Freezing is carried out in three phases: first, cooled to -25°C at 0.9-1.1 °C/min. then cooled to -75°C at 2-2.5 °C/min. then cooled to -196°C, placing marine microalgae cells in liquid nitrogen. Dimethyl sulfoxide (DMSO) or ethylene glycol can be used as penetrating cryoprotectant. Trehalose or polyvinylpyrrolidone (PVP) can be used as non-penetrating cryoprotectant.EFFECT: invention enables to increase the yield of viable, functionally active cells of microalgae after freezing-thawing and to restore their culture for a week after cryopreservation, while providing a quantitative assessment of the functional state of the microalgae.3 cl, 1 dwg, 3 tbl, 5 exИзобретение относится к области криобиологии, клеточной биологии, морской биотехнологии и гидробиологии. Проводят обработку клеток морских микроводорослей криопротекторной смесью, содержащей проникающий и непроникающий криопротекторы и питательную среду. Осуществляют замораживание с последующим сохранением в жидком азоте. В качестве питательной среды берут стерильную морскую воду при следующем соотношении компонентов, в масс.%: проникающий криопротектор 5-7,5% непроникающий криопротектор 1,5-3% стерильная морская вода - остальное. Перед замораживанием проводят инкубацию клеток морских микроводорослей на ледяной бане в течение не менее 10 минут. Замораживание ведут
