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一种提高转染效率的表达载体pEGFP‑N1‑p53/MAR、构建方法及转染方法
- 专利权人:
- 河南科技大学
- 发明人:
- 雷雪芹,徐廷生,史明艳,宋祯,李振红,王攀林
- 申请号:
- CN201510819683.8
- 公开号:
- CN105524939B
- 申请日:
- 2015.11.23
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2018
- 代理人:
- 张爱军
- 摘要:
- 本发明公开了一种提高转染效率的表达载体pEGFP‑N1‑p53/MAR、构建方法及转染方法,该表达载体pEGFP‑N1‑p53/MAR将人抑癌基因p53和鸡的核基质附着区MAR基因插入表达载体中构建而成。本发明通过RT‑PCR和PCR法分别从早期肺癌病人的外周血和鸡的肝脏组织中获取人抑癌基因p53和鸡的调控序列MAR,通过酶切、连接、转化等手段构建含有EGFP基因的真核重组表达载体pEGFP‑N1‑p53/MAR。同时,本发明将表达载体pEGFP‑N1‑p53/MAR转染鸡胚盘,结果发现本发明的转基因鸡孵化率达到56.4%。在成活的转基因鸡只中有7只检测出了目的基因p53条带的存在,阳性检测率为18.9%。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/