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卷烟烟气总粒相物诱导细胞氧化应激GSH/GSSG的测定方法
专利权人:
中国烟草总公司郑州烟草研究院
发明人:
李翔,张世敏,谢复炜,赵俊伟,尚平平,康彧
申请号:
CN201510460904.7
公开号:
CN105004689B
申请日:
2015.07.31
申请国别(地区):
中国
年份:
2017
代理人:
姜振东
摘要:
一种卷烟烟气总粒相物诱导细胞氧化应激GSH/GSSG的测定方法,包括以下步骤:1)配制实验试剂;2)制备卷烟烟气总粒相物;3)细胞接种培养;4)卷烟烟气总粒相物染毒;5)样品处理及GSH/GSSG测定;6)结果分析。本发明应用SBB缓冲液重悬细胞,防止人为的氧化GSH,同时增加了样品的有效处理时间;考虑到细胞裂解液中存在活性巯基的蛋白质,为了减少非谷胱甘肽的硫化物与DTNB结合而干扰检测,在样品测定前,加入5‑磺基水杨酸用于脱去样品中蛋白质,减少了测定过程中的干扰;由于本方法同时检测GSH和GSSG,在结果处理时应用了差减法,可分别得到GSH和GSSG浓度,本发明具有耗时短,操作简便,灵敏度高,结果可靠的优点。
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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