一种解毒酶基因在家蚕中稳定表达系统的构建方法
- 专利权人:
- 成都天创生物科技有限责任公司
- 发明人:
- 张莉,李维,郭聪
- 申请号:
- CN03118855.9
- 公开号:
- CN1514003A
- 申请日:
- 2003.03.27
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2004
- 代理人:
- 王敏锋
- 摘要:
- 本发明公开了一种解毒酶基因在家蚕中稳定表达系统的构建方法,首先是设计合成寡聚脱氧核糖核苷酸引物;其次是将解毒酶基因的cDNA或其氨基酸序列对应的DNA序列与家蚕丝蛋白L链启动子和终止子相连构建融合基因,并一起插入转座因子piggyBac的两个反向重复末端序列之间,得到重组的转座子;第三是用转座酶基因构建转座酶基因表达载体;第四是将得到的重组转座因子和转座酶基因表达载体同时转化家蚕卵;第五是通过培养和筛选被转化的家蚕卵形成的幼蚕,得到稳定表达外源解毒酶脂酶B1的转基因家蚕。本发明方法易行、操作简便、转化率高、家蚕蛹中脂酶B1含量为52%。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心