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PTD-Apoptin融合蛋白原核分泌表达的构建方法及其应用
- 专利权人:
- 辽宁大学
- 发明人:
- 贲松彬,刘雪梅,崔剑,陈长兰,李其久
- 申请号：
- CN201210158339.5
- 公开号：
- CN102703489B
- 申请日:
- 2012.05.22
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2013
- 代理人:
- 摘要：
- 本发明涉及PTD-Apoptin融合蛋白的分泌表达载体的构建方法及其应用。将PTD-Apoptin序列连接到pET22b(+)分泌表达载体上，构建原核分泌表达载体pET22b(+)-PTD-Apoptin，经IPTG诱导，将表达的目的蛋白分泌到大肠杆菌周质空间中，渗透法提取周质空间蛋白，剩余细胞组分经超声破碎后，分离上清和沉淀，进行SDS-PAGE分析。将周质空间中PTD-Apoptin融合蛋白与胃癌823细胞共孵育，MTT法检测融合蛋白对胃癌823细胞的抑制作用。采用本发明的方法重组PTD-Apoptin蛋白可以分泌至大肠杆菌周质空间中，且以可溶状态存在，分泌表达的重组PTD-Apoptin蛋白具有生物活性，对胃癌823细胞的最大抑制率为82.95%。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
