一种噬菌体展示表达圆环病毒抗原疫苗的制备方法

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专利权人:

山东信得科技股份有限公司

发明人:

李明义,高江明,刘阳,李晓林,单学强,张伦,冯晶晶,李佳棋,孙化露,葛栋,郭春丽

申请号：

CN201410515139.X

公开号：

CN104474540A

申请日:

2014.09.29

申请国别(地区):

中国

年份:

2015

代理人:

张良

摘要：

本发明提供一种噬菌体展示表达圆环病毒抗原疫苗的制备方法，包括以下步骤：提取猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)RNA，反转录，聚合酶链式反应(PCR)扩增获取猪Ⅱ型圆环病毒ORF2基因开放阅读框片段，并铆定定向插入T4噬菌体；利用免疫筛选的方法获取具有ORF2基因的T4噬菌体；经纯化后重新侵染X-Blue ST1(CCTCC M 2014397)宿主细胞；发酵培养获得的X-BlueST1宿主细胞，诱导表达灭活后培养物作为抗原；ELISA标定抗原效价，并用生理盐水倍比稀释抗原终浓度为10⁷U/ml；1:2.5的比例加入疫苗佐剂，即为疫苗。本发明利用噬菌体表达猪圆环病毒Ⅱ型抗原并制备疫苗，避免了弱毒疫苗毒力返强风险，且采用发酵培养利于大规模工业化生产，成本远低于通过细胞培养的方式生产疫苗。

来源网站：

中国工程科技知识中心

来源网址：

http://www.ckcest.cn/home/